（六）培养

打开电源开关，打开气泵，设定温度至所需温度，（应缓慢升温）设定时间至最大值，打开过滤器上进气阀门和进罐阀门和呼吸器上进气阀和排气阀，调节气的翻腾度和压力至0.03MPa，待压力稳定和温度稳定后（打开外套加热开关）即可。

每天观察馆内料液的颜色，闻呼吸器排出的气味并在火焰保护下取样，划平板，记录，接取样瓶，根据馆内情况适当加大或减少通气量。详细流程请参考：的方法。

培养注意事项：

1，液体菌种接种以后培养过程中通气时要先小量通气，当培养液菌球数量达到50%以后再加大通气量。

2，在液体菌种培养过程中从接种以后的每24小时取样检测一次。取样的过程中要严格按照标准流程操作。杜绝取样造成的2次污染。

3，镜检方法简介如下：

无菌环境下取含有菌丝的培养液，放到载玻片上，在用盖玻片盖好，放到显微镜观测架上可燃气体报警器，通过目镜调整适当倍数观测菌丝形态结构液体接种枪的结构，是否有锁状联合甲烷检测仪，是否有细菌，病毒等不明微生物感染等情况。

（七）放液接种

看菌种的菌丝量，菌球量，当菌丝量达到90%以上时，平板检测液体接种枪的结构，取样瓶检测无杂菌污染时方可接种。将接种管道消毒后与发酵罐在火焰保护下对接（管道用棉花塞住）接种枪与枪头同样在火焰下对接液体接种枪的结构，对接好的接种管道在调节好压力时。打开出菌种阀门，将菌种从接种枪放出一部份，用量筒测试出10mL的时间，之后再两到三人的配合下接种，接种时将枪头插入料袋用力握枪，在所需时间内拔出并松开接种枪并盖好料袋塞子（接种前接种室要提前消毒，接种时不得说话并戴口罩，手套，不得在接种室内走动）。

接种注意事项:

1,接种前要严格检测液体菌种是否感染，保持疑似感染，坚决不用的原则。严格监控菌龄，超龄菌种不宜使用。

2，接种过程中严格控制接入菌种量，定时校枪，预防空枪接种。

3，接种后控制培养温度，不宜过低使液体菌种迅速萌发，以保障成活率。

（八）清洗

使用完毕的发酵罐即时清洗，清洗时不得留死角，清洗完毕后加水至内层与外层的试镜中心，加水完毕后盖好压紧待下次使用，定期检查阀门，加热管等是否正常。

简述液体菌种后期发酵培养的制作过程和培养好以后的接种流程，关于液体菌种生产技术暂时告一段落，有不明白的朋友欢迎大家在【液体菌种200问】的文章下方留言讨论。更多液体菌种生产技术资料可以点击本文下方的相关链接查阅。