大鼠全脑照射后脑内一氧化氮含量的变化论文【摘要】 ［目的］观察大鼠全脑照射后脑组织中一氧化氮（NO）含量的变化，探讨放射性脑损伤中NO所起的作用。［方法］ 对SD大鼠用4MeV电子线单次全脑5Gy、15Gy和30Gy照射后，于照射后6h、1d、2d和3d检测大鼠大脑皮层中NO的含量。［结果］5Gy、15Gy和30Gy照射后1d、2d，脑内NO随照射剂量递增而增加（P 0.05），而在6h和3d各剂量组无差异。各剂量组在1d时脑内NO达峰值，2d时逐渐下降，3d时恢复对照组水平。［结论］ 大鼠全脑照射后脑组织中NO升高液化气报警器，它在放射性脑损伤的发病机制中可能有重要的作用。 【关键词】 脑 辐射电离 一氧化氮 大鼠 辐射损伤 脑损伤 Changes on Concentration of Nitric Oxide in Brain Follo. The concentrations of NO in the brain cortex tissue supernatant easured at the 6 hour, day 1, day 2 andday 3 postirradiation.［Results］The levels of NO in the brain 1 day and 2 days postirradiation increased ight play an important role in the pathogenesis of brain radiation injury. Key l/100g体重）对大鼠进行腹腔麻醉，用Philips SL18型加速器产生的能量为4MeV的电子线照射，详细的投照与剂量确认方法见前文报告3。

1.2 实验方法 各组大鼠麻醉后，用含肝素的生理盐水（250ml左右）经主动脉作全身灌注一氧化氮含量，完整取脑。取大脑皮层100mg左右，按20：1加入0.1mol PBS液后充分研磨10min，将匀浆置于Eppendorf管内，在4℃恒温、15000r/min的条件下离心20min（德国Biofuge22 离心机），取上清液于-70℃保存。 1.3 测定指标 将上述方法收集的大鼠大脑皮层上清液每组取6份进行测量，依照南京建成生物工程研究所提供的试剂盒的说明进行操作。 1.4 统计学处理方法 计算14个组的脑组织中一氧化氮的含量，以均数±标准差(x±s)表示。采用方差分析，先分析同一时间点不同剂量之间的差别；然后再分析同一剂量下不同时间点之间的差别。 2 结 果 6h 与3d 时各剂量组之间大鼠脑组织中NO含量无差异。1d 时5Gy 、15Gy和30Gy组大鼠脑皮质NO含量较对照组明显升高（P 0.01），随着剂量递增脑内NO含量增加，其中15Gy和30Gy组同5Gy组比较有明显差异（P 0.01）一氧化氮含量，15Gy和30Gy组之间比较P 0.05。2d时15Gy和30Gy组较对照组明显升高（P 0.01），15Gy和30Gy组较5Gy组P 0.01一氧化氮含量，而15Gy和30Gy组之间比较没有差异（P 0.05）。

而在5Gy照射后脑内NO含量1d时达到高峰，同其它时间点比较差异显著（P 0.01）。15Gy及30Gy 照射后表现为同样的结果，1d时为峰值汽油检测仪，同其它时间点比较差异显著（P 0.01），2d时逐渐下降，同1d及3d比较有显著性差异，与6h组比较也有差异（P 0.05）。为了了解实验中水合氯醛腹腔麻醉对NO含量的影响，设计了麻醉但未照射的对照组，大鼠脑组织上清液中NO的含量麻醉对照组为（0.87±0.08）μmol/g，与正常对照组（0.86±0.06）μmol/g比较差异无显著性。 3 讨 论 目前已知NOS亚型有3大类，即神经元型（nNOS）、内皮细胞型（eNOS）和诱导型（iNOS），nNOS和eNOS在正常生理条件下即有表达，而iNOS的合成需外界刺激的作用，iNOS一旦生成即连续催化产生NO，而过量的NO则引发组织的某些病理生理过程的发生 4。 亚致死剂量γ射线照射小鼠后，体内一些器官（肝、肠、肺、肾、脑、脾和心脏）NO产生增加。Lestaevel等5报道给予大鼠15Gy全身照射，脑内的NO于照射后即刻升高，1 d达到高峰。用iNOS抑制剂（AMT）处理后，NO下降到平均基础水平，说明NO升高可能通过iNOS介导。

Clarencon等6通过腹主动脉探测NO电信号实验发现，γ射线15Gy照后12min增高13%，照后130min缓慢增高18%；另外，经胸腔穿刺取血检测NO电信号，15Gy照后90min增高17%，照后24 h增高25.6%，照后3d明显降低。 本研究应用硝酸还原酶法检测大脑皮层组织上清液中NO的变化，在排除了实验中麻醉对含量的影响后，我们观测到在1d、2d 两个时间点，NO水平表现出剂量依赖性升高。而在5、15和30Gy照射后1d时脑内NO达高峰，2d逐渐下降，3d恢复照射前水平。 由此看来，在大鼠大脑受到较大剂量照射后，NO在脑内含量升高。结合大鼠在照射后，脑内血液循环和兴奋性氨基酸、炎性细胞因子等变化特点3，推测由于脑内兴奋性氨基酸的释放，通过激活N甲基D天门冬氨酸（NMDA）受体，使细胞内钙增加，激活结构型NOS活性，使NO生成增加7；另外，脑组织分泌白细胞介素1和肿瘤坏死因子增加，又可激活iNOS，使其表达增加，生成过量的NO8。 本实验研究表明，在大鼠放射性脑损伤后，脑组织内NO水平升高。过量的NO可通过多种途径对脑组织造成损害，引起迟发的不可逆的神经元损伤。【

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